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          神經(jīng)干細(xì)胞基的使用注意事項(xiàng)

          更新時(shí)間:2014-10-28 點(diǎn)擊次數(shù):1306

             神經(jīng)干細(xì)胞基的使用注意事項(xiàng)

          1.在配制*培養(yǎng)基前,請(qǐng)把間充質(zhì)干細(xì)胞無動(dòng)物源生長添加劑(MSCGS-xf)、青霉素-鏈霉素(P/S)放到2-8℃冰箱過夜解凍,然后加入到基礎(chǔ)培養(yǎng)基中。
           
          2.在使用*培養(yǎng)基前,需要把培養(yǎng)基放到37℃恒溫水浴中預(yù)熱,注意溫度不要超過37℃。
           
          3.請(qǐng)把配制好的*培養(yǎng)基放在4℃冰箱避光保存,并盡量在一個(gè)月內(nèi)使用完。若培養(yǎng)基要分幾次使用,請(qǐng)將間充質(zhì)干細(xì)胞無動(dòng)物源生長添加劑(MSCGS-xf)、青霉素-鏈霉素 (P/S)解凍按用量分裝后保存。
           
          4.可不包被培養(yǎng)瓶,但配合貼壁材料Attachin(貨號(hào)BW110028)使用效果更佳。
           

          免疫細(xì)胞化學(xué)染色具體方法為:

          (1) 0.05M PBS漂洗 10min×3次

          (2) 0.3%H2O2/0.05M PBS室溫 30min

          (3) 0.3%Triton-100/0.05M PBS 37 ℃,15min

          (4) 0.05M PBS漂洗 10min×3次

          (5) 5%羊血清/0.05M PBS 37 ℃,15min

          (6) I抗(2%羊血清/0.05M PBS配) 4℃,48h

          (7) 0.05M PBS漂洗 10min×3次

          (8) II抗(2%羊血清/0.05M PBS配,1:200) 37 ℃,1.5h

          (9) 0.05M PBS漂洗 10min×3次

          (10) AB復(fù)合物(0.05M PBS配,1:100) 37 ℃,1.5h

          (11) 0.05M PBS漂洗 10min×3次

          (12) Tris-HCl緩沖液 37 ℃,15min

          (13) DAB顯色 20min

          (14) 蒸餾水漂洗 10min×3次

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